El regulador alosterico más significativo  de la PFK-1 es la fructosa 2,6-bisfosfato: activa poderosamente el enzima. El papel especial del hígado para el mantenimiento del nivel de la glucosa en la sangre  requiere mecanismos reguladores adicionales, cuando descienden los niveles de glucagón el hígado libera glucosa. Una fuente de esta son las reservas de glucógeno en hígado. Cuando se fija la fructosa 2,6-bisfosfato a su sitio alosterico sobre la  PFK-1, aumenta la afinidad  de este enzima por su sustrato  la fructosa 6-fosfato y reduce su afinidad por los inhibidores alostericos ATP y citrato.

 A las concentraciones fisiológicas  de sus sustratos  ATP  y fructosa 6-fosfato así como de los restantes  efectores positivos  y negativos (ATP, AMP y citrato), la PFK-1 es virtualmente inactiva en ausencia de  fructosa 2,6-bisfosfato.

        

La xilulosa 5-fosfato: es un producto de la ruta de las hexosas monofosfato, es un regulador que actúa controlando la concentración de fructosa 2,6-bisfosfato. En el hígado de los mamíferos favorece el aumento de la glicólisis.

La concentración de xilulosa 5-fosfato aumenta a medida que la glucosa  que entra en el hígado se convierte en glucosa 6-fosfato y se dirige tanto a la ruta glucolitica  como a las de las hexosas monofosfato. La xilulosa 5-fosfato activa una fosfoproteína fosfatasa la PP2Q,  que desfosforila al enzima bifuncional PFK-2/FBPasa2. La desfosforilacion activa la PFK-2  e inhibe la FBPasa-2 con lo que consigue aumento  de la fructosa 2,6-bisfosfato estimula la glucólisis e inhibe la glucogénesis.

Cantidad de ATP: Para una célula, es de suma importancia mantener constante el suministro y concentración de ATP; si la ATP disminuyera la velocidad de muchas reacciones disminuirían  y la célula no sobreviviria. Lo mismo es cierto par otros cofactores  como NADH/NAD+ Y NADPH/NADP+.

Isozimas: En los vertebrados hay al menos tres isozimas de la piruvato quinasa que difieren en su distribución tisular y en su respuesta a los moduladores. 

El páncreas “detecta” cambios en la concentración de glucosa y otros nutrientes en la circulación y a través de la secreción de insulina o glucagón regula el uso de estos combustibles por los distintos tejidos del organismo.

 Cantidad de ATP: Para una célula, es de suma importancia mantener constante el suministro y concentración de ATP siendo que muchas enzimas  tienen un Km  de  0.1 y 1 Mm, la   concentración para una célula típica es de 5 Mm.